ELISA样本制备指南及注意事项

ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。

样本制备指南

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血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品

2.血浆

不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。

虽然按照多囊卵巢诊断标准来看，在月经第五天基础卵泡超过13个确实有可能是多囊，但是其还需要结合基础检查和b超检查才能确诊。如果患者性激素检查正常且没有稀乏的排卵或者无排卵，那就不是多囊卵巢，只是患者卵巢储备功能较好罢了。但如果患者出现了排卵异常，并且伴随有月经稀发，高雄激素等多囊卵巢综合症症状，那基本就可以确诊是多囊了。

基础卵泡又称始基卵泡，从胚胎时期就存在。在青春期发育前始基卵泡一直处于闭锁状态，青春期在体内激素的作用下，始基卵泡开始发育，一般每个月只有一个优势卵泡发育成熟并排卵。一般基础卵泡在3-10个之间是正常的，如果在月经第五天出现13个可以是因为以下原因：

1.卵巢储备功能好：有些较为年轻的患者，一般卵巢状态、功能会比较好，会出现基础卵泡较多的情况；

2.多囊卵巢：基础卵泡数13个属于是较多的，如果同时伴有多囊其他症状，大概率就是多囊卵巢；

3.其他疾病：垂体激素分泌紊乱也会导致女性出现基础卵泡过多的情况，这需要及时治疗才行。